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培养基(Medium)是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。不同培养基可根据实际需要,添加一些自身无法合成的化合物,即生长因子。有些微生物,如自养型微生物,不需要碳源,所以上述物质只具有一般性。
高考生物必备知识点:培养基的主要特点
培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在2~6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,现在均改制成粉末。
高考生物必备知识点:培养基
划分标准 | 培养基种类 | 特点 | 用途 |
物理性质 | 液体培养基 | 不加凝固剂 | 工业生产 |
半固体培养基 | 加凝固剂,如琼脂 | 观察微生物的运动、分类、鉴定 | |
固体培养基 | 加凝固剂,如琼脂 | 微生物分离、鉴定、活菌计数 | |
化学组成 | 天然培养基 | 含化学成分不明确的天然物质 | 工业生产 |
合成培养基 | 培养基成分明确(用化学成分已知的化学物质配成) | 分类、鉴定 | |
目的用途 | 选择培养基 | 培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长 | 培养、分离出特定微生物 |
鉴别培养基 | 根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品 | 鉴别不同种类的微生物 |
高考生物必备知识点:培养基的配制
1.配料
配方换算→在容器中加入少量水(蒸馏水,自然水)→按照配方称取各种药品(依次加入)→加足所需水量(一药一勺,取药后立即盖上瓶盖)。
2.溶解
淀粉溶解:少量冷水调成糊状
加热溶解,特别是加有琼脂的培养基,一定要煮沸,琼脂的熔解温度95-97℃ ,且需要边加热边搅拌以防止烧焦。
3.调PH
用1N的盐酸或1N的 NaOH把培养基调节到所要求的值。
4.过滤
滤纸或棉花进行过滤。(有时可以省去)
5.分装
一般培养基放在三角瓶或试管中灭菌使用。
(1)三角瓶
若作静置培养,则100ml培养基/250ml的三角瓶,最多不能超过150ml培养基/250ml的
三角瓶,否则灭菌时培养基沸腾容易污染棉塞,造成染菌;若作摇瓶培养,则15-20ml培养基/250ml的三角瓶,保证通气良好。
(2)试管分装
液体培养基一般装4-5ml,约试管的1/4高度;
固体斜面培养基一般装3-4ml,约试管的1/5高度。
6.包扎
分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。
7.灭菌
按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养
基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。
8.摆斜面
灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。
9.贮存
培养基在30℃下放置一天,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用
注:1、选择适宜的营养物质
2、营养物质浓度及配比合适
3、控制pH条件
4、控制氧化还原电位
5、原料来源的选择
6、灭菌处理
高考生物必备知识点:选择培养基标准
选择培养基没有一定标准,一般遵循以下几点:
(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基;
(2)可以查阅文献或在购买细胞株时咨询;
(3)平常惯用的培养基;
(4)许多培养基可以适合多种细胞,根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基;
(5)用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断;
(6)根据实验结果选择最佳培养基,这是最客观的方法,但比较繁琐。
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