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瘦肉精快速检测卡工厂 瘦肉精快速检测卡购买篇一
摘 要
本实验采用了百睿tm盐酸克伦特罗快速检测卡对样品进行定性检测。盐酸克伦特罗快速检测卡适用于尿样、瘦肉、肝脏、肺脏、肾脏和饲料等样本中盐酸克伦特罗的测定。检出限为3ng/ml（3ppb）。关键词 盐酸克伦特罗快速检测卡
定性
检出限
前 言
盐酸克伦特罗(clenbuterol,clb),又名瘦肉精,分子式为c12h18cl2n2o•hcl,药品名为克喘素、氨哮素等,为白色或类白色的结晶粉末,无臭、味苦,易溶于水、甲醇、乙醇,微溶于丙酮、氯仿,不溶于乙醚和苯,化学性质稳定;它是一种人工合成的b-肾上腺素受体激动剂,具有扩张支气管的作用,常用来防治哮喘、肺气肿等肺部疾病(mersmann,1998)。当其应用剂量达到治疗量的5~10倍时,又具有能量重分配作用,可使肌肉合成增加,脂肪沉积减少,因此将其俗称为瘦肉精,在养猪业中一些非法使用者将其作为一种生长促进剂添加到饲料中(kuip-er,1998),用以改善胴体的品质,但同时也造成了猪肉中盐酸克伦特罗的残留。当人们食用含有盐酸克伦特罗残留的肉品后,常常造成心动过速,低血钾,低磷酸盐血症,肌肉震颤,头晕,口干,失眠甚至于瘫痪等中毒症状,对心脏病患者更有生命危险。国家农业部农牧发[2002]1号文5关于发布食品动物禁用的兽药及其他化合物清单的通知6中,盐酸克伦特罗被列为所有食品动物禁止使用。
1实验步骤
（1）使用前将待测样本溶液恢复至室温
（2）取出检测卡平放，用移液枪吸取待测样品溶液100ul，垂直加于加样孔，开始计时
（3）结果应在3~5min读取，其他时间判读无效，根据示意图判定结果。
【结果判断】
阴性（-）：两条紫红色条带出现。表示样品中盐酸克伦特罗浓度低于3 ng/ml，或不含有。
阳性（+）：检测t线无显色，则表示样品中盐酸克伦特罗浓度高于3 ng/ml。
无效：未出现质控c线，表明操作过程不正确或检测卡已失效。实验结果
实验结果如下图 1
由图可知，左边表示样品中盐酸克伦特罗浓度低于3 ng/ml，或不含有盐酸克伦特罗；右边样品中盐酸克伦特罗浓度高于3 ng/ml。
3结果与讨论
3.1实验原理
若待测样品溶液中不含盐酸克伦特罗,当样品溶液进入测试端,盐酸克伦特罗金标单抗在硝酸纤维素膜上层析泳动,被硝酸纤维素膜上检测印迹处的盐酸克伦特罗-bsa偶联物拦截形成盐酸克伦特罗-bsa偶联物)金标盐酸克伦特罗单抗 复合物,并在该印迹处形成红色的条带(检测线);测试端多余的金标盐酸克伦特罗单抗在硝酸纤维素膜上继续层析可被对照印迹羊抗鼠igg单克隆抗体捕获形成红色的对照条带(对照线)。当待测尿样中含有一定量的盐酸克伦特罗时,盐酸克伦特罗与盐酸克伦特罗金标单抗形成复合物,从而与硝酸纤维素膜上的盐酸克伦特罗-bsa偶联物形成竞争,抑制了检测印迹处包被的盐酸克伦特罗-bsa偶联物捕获盐酸克伦特罗金标单抗的量,而不能在检测线形成红色印迹或形成颜色较浅的红色印迹,多余的盒标盐酸克伦特罗单抗继续层析在对照印迹处形成对照线。根据该反应模式,检测线颜色深浅与样品中盐酸克伦特罗含量呈负相关,即检测线颜色越浅表示样品中盐酸克伦特罗含量越高。3.2 试纸条组成
1.样品垫的作用是尽快地将加样孔中的样品吸附到试纸中去，以利于继续加样； 2.结合垫中则是含有胶体金标记的盐酸克伦特罗单抗；
3.硝酸纤维素膜上则预先标记了两种物质，在检测线处标记的是盐酸克伦特罗-bsa偶联物。
4.吸收垫一般由吸水纸构成，主要作用是保持从加样垫到吸收垫之间的毛细管作用力[1]。
参考文献
[1] 姜艳彬，孙冠如，王海，等.盐酸克伦特罗胶体金快速检测试纸条的研制[j].中国畜牧兽医.2010(10): 109-113.
瘦肉精快速检测卡工厂 瘦肉精快速检测卡购买篇二
猪繁殖与呼吸综合症抗体快速检测试剂盒
——（胶体金法）使用说明书
1、检测原理
猪蓝耳病抗体快速检测试剂盒（胶体金法），系采用胶体金免疫层析技术，检测样品（血清、血浆或全血）中蓝耳病抗体的方法。在玻璃纤维纸上预包被金标记灭活猪蓝耳病抗体（au-agl）,在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被猪蓝耳病抗原（ag2）和兔抗猪蓝耳病抗体。当检测样品为阳性时，样品中猪蓝耳病抗体与胶体金标记猪蓝耳病抗原（au-agl）结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被的猪蓝耳病抗原(ag2)形成“au-agl-猪蓝耳病抗体-ag2-固相材料”免疫复合物而凝聚显色，游离金标记抗原则在对照线处与兔抗猪蓝耳病抗体结合而富集显色。阴性样品则仅在对照线处显色。操作简便，快速，结果直观、准确，灵敏度高，容易判定。
2、试剂组成
“猪蓝耳病抗体”快速检测卡（20 块）； 说明书1份
3、用途
用于检测猪血清/血浆/全血样品中猪繁殖与呼吸综合症（又称蓝耳病，以下同，porcine reproductive and respiratory syndrome,prrs）抗体。
4、操作步骤以及结果判读：
⑴ 将检测卡从铝箔袋中取出，水平放置并做好标记。
⑵ 在检测卡的加样孔内加入2滴（70-100ul）待检血清/血浆/全血标本。⑶ 20分钟内观察并记录实验结果。
阳性：对照线区（c）和检测线区（t）各出现一条紫红色线。检测线(t)的颜色越深，表明猪蓝耳病抗体的滴度越高。
阴性：只有对照线区(c)出现一条紫红色线。
无效：未出现紫红色线或只在检测线区（t）出现紫红色线，对照线区（c）未出现紫红色线。
5、储存及有效期：
原包装在2-30℃阴凉避光干燥处储存，有效期为12 个 月，批号和有效期见包装盒。
6、注意事项：
(1)检测卡在室温下一次性使用。
(2)自来水、蒸馏水或去离子水不能作为阴性对照。
(3)实验环境应保持一定湿度，避风，避免在过高温度下进行试验。
(4)试剂盒在室温下保存.如在2-8℃冷藏，使用前降至室温后方可打开铝箔袋进行检测操作。
瘦肉精快速检测卡工厂 瘦肉精快速检测卡购买篇三
综述盐酸克伦特罗的
药理作用、在机体内的残留性及检测技术
摘要：由瘦肉精引起的中毒事件屡见不鲜，而品种繁多的瘦肉精中盐酸克伦特罗是使用最普遍的一种，本文从盐酸克伦特罗的理化性质、药理作用、残留性、检测方法等方面详细介绍其对人体的危害，为我们更好的认识和抵制瘦肉精提供参考。关键词：理化性质；药理作用；毒性；残留性；检测方法
瘦肉精是一类药物，而不是某一种特定的药物，任何能够促进瘦肉生长、抑制肥肉生长的物质都可以叫做“瘦肉精”。在中国，通常所说的瘦肉精是指克伦特罗，而普通消费者则把此类药物统称为瘦肉精。当它们以超过治疗剂量5-10倍的用量用于家畜饲养时，即有显著的营养“再分配效应”——促进动物体蛋白质沉积、促进脂肪分解抑制脂肪沉积，能显著提高胴体的瘦肉率、增重和提高饲料转化率，因此曾被用作牛、羊、禽、猪等畜禽的促生长剂、饲料添加剂。
1.盐酸克伦特罗的理化性质及药理作用
1.1 理化性质
中文名：瘦肉精；克伦特罗；学名：盐酸克伦特罗(clenbuterol hydrochloride)，又称氨哮素、克喘素氨双氯醇胺，化学名称为羟甲叔丁肾上腺素，是一种平喘药。该药物既不是兽药，也不是饲料添加剂，而是肾上腺类神经兴奋剂。相对分子量：313.7，分子式：c12-h18-cl12-n2-o·hcl；
图1 盐酸克伦特罗结构式
盐酸克伦特罗的外观与性状：白色或类白色的结晶粉末，无臭、味苦；熔点：174～175.5°c；溶解性：溶于水、乙醇，微溶于丙酮，不溶于乙醚[1]。1.2 药理作用
20世纪70年代中后期,克伦特罗作为一种伦特罗1000～3000 μg 具有促进新的、选择性的β肾上腺受体激动剂逐步应用于临床试验,它能够引起交感神经兴奋在治疗剂量下,强而持久地松弛支气管平滑肌,口服治疗剂量仅为 30～40 μg/d, 对支气管哮喘和伴随有逆性气道梗塞的慢性支气管炎均有良好的效果,能较长时间地增加肺的最高呼气量(pefr)，用药剂量仅为舒喘宁片的1%, 副作用和对心血管系统的作用不明显。克伦特罗可作为支气扩张剂治疗慢性梗塞性肺部疾病,用吸入法给药,有效剂量可低至12ug；口服效果是特布他林的170倍，对心率和血压的影响不明显。克伦特罗进入机体后, 与广泛分布于呼吸道效应细胞膜上 的β2受体结合,导致受体构型改变,激活腺苷酸环化酶,催化细胞内 atp转化为camp,后者激 活camp依赖性蛋白激酶,促使胞浆中游离钙浓度下降钾通道开放引起平滑肌松弛而缓解 喘息等症状除松弛支气管平滑肌外克伦特罗也激活β2肾上腺受体克伦特罗能增加神经生长 因子的表达而起到保护神经系统的作用,也能防止大鼠诱导性肝细胞凋亡。此外,克伦特罗可能具有治疗过敏性炎症的作用并可以在抑制失神经肌萎缩的同时不影响或很少影
响正常肌 肉和心脏,促进神经修复后肌肉功能的恢复等多种生理功能[2]。
2.盐酸克伦特罗的毒性 世纪80年代初人们发现在肉用动物生产中每天使用克伦特罗1000～3000ug具有促进肌 肉发育和脂肪分解的作用,可明显提高饲料的利用率和瘦肉率,具有能量重分配的作用。其机理是高剂量克伦特罗通过作用于骨骼肌的β-2肾上腺受体,引起肌肉中环磷酸腺苷和乳酸浓度 的快速升高,肌糖元浓度下降,加快肌肉蛋白质的合成速度长期连续使用能增加肌肉体积、增加体重。对心肌和后肢肌肉影响最明显,使左心室比目鱼肌和深浅腓肠肌肌纤维显著性增大。但在猪等肉用牲畜中投喂克伦特罗,即使是屠宰前停药肝肺中仍可检出较高浓度的克伦特罗。肉中的克伦特罗可使人体出现多种毒副作用,导致体内聚胺浓度升高而继发心脏肥大。一次性摄入克伦特罗的量过大,可迅速造成心率过速,对原有心律失常的病人更易发生心脏反应，严重时可出现心肌梗死。同时,由于激活na+质谱法
气相色谱-质谱联用法（gc/ms）可以在多种残留物同时存在的情况下对某种特定的残留物进行定性定量分析，且具有较高的灵敏度，是检测盐酸克伦特罗残留的常用的方法之一。气相色谱-质谱联用法可用于饲料、血液、组织中盐酸克伦特罗的分析，检测限为0.5μg/kg。与高效液相色谱法相比，检测灵敏度更高，假阳性率更低。因此，中国、欧盟及美国等国家将气相色谱-质谱联用法定为检测盐酸克伦特罗的确证性方法。
吴银良等[13]（2006）建立了同时测定动物肝组织中盐酸克伦特罗和盐酸莱克多巴胺残留量的固相萃取-气相色谱-质谱分析方法，并且盐酸克伦特罗和盐酸莱克多巴胺的检出限分别为0.30μg/kg和1.00μg/kg。王红等[14]（2007）也简化了方法，测定了动物肝脏组织中的盐酸克伦特罗。本方法所需设备昂贵，操作繁琐，分析检测前要对分子上羟基、氨基等极性基团衍生化，难以作为常规方法应用，不能进行现场检测。
4.3 酶联免疫吸附法（elisa）
4.3.1 酶联免疫分析
目前，检测盐酸克伦特罗较高效的免疫分析技术是酶联免疫吸附测定法（elisa）。该方法检测下限一般1.0μg/l（尿样）、0.5μg/kg（组织）。使用该法，酶联免疫吸附测定法检测限尿液为0.3～1.0 ng/ml，组织为0.2～1.0 ng/mg。国内外有许多检测试剂盒，但质量不一。酶联免疫吸附测定法作为盐酸克伦特罗残留量的筛选方法具有操作简便、准确、投资小、成本低、速度快、灵敏度高、仪器设备简单等优点，适合对活体动物作大批量样品的快速分析；缺点是仍不能实现现场检测，且该法检测结果假阳性率较高，尤其当样品中含有抗生素或磺胺类药物时，会使假阳性率进一步提高[15]。
4.3.2 放射免疫分析技术
ropitar和zimmer首次报道用于β-2肾上腺素能激动剂的放射免疫测定程序和动物组织中盐酸克伦特罗的药理学研究。delahaut等[16]描述了建立更为特异的放射免疫方法，其中抗盐酸克伦特罗的抗体对其他β-2肾上腺素能激动剂的交叉反应小于10%，最低检测限可达到0.5 ng/g。目前国外已生产出测定盐酸克伦特罗的试剂盒产品，还建立了类似放射免疫分析法的放射受体分析法，这是用受体代替抗体结合盐酸克伦特罗，检测限可达到2.4 ng/g。
放射免疫分析技术虽然具有特异性强、灵敏度高、操作简便、快速、易标准化、技术成熟等优点。但仪器价格昂贵和必须使用放射性同位素作为标记物，存在着辐射防护及防止污染的问题，且试剂盒使用时间短，而且每次操作都要做标准曲线，可测量范围相对较窄，难以实现操作及测量的自动化等。4.4 滴金免疫技术
原理通过盐酸克伦特罗cl（或莱克多巴胺rac）与cl-bsa（盐酸克伦特罗-牛血清白蛋白）偶联物（或rac-bsa）竞争结合抗cl（或rac）单克隆抗体-胶体金复合物，使试纸上反应线颜色变化，以判定样品中cl（或rac）的含量。当检样中cl（或rac）浓度低于最低检测水平时，胶体金中的抗cl（或rac）单抗-胶体金复合物与t线上的cl-bsa偶联物（或rac-bsa）结合，t线呈色与c线相近：当检样中cl（或rac）浓度大于5ng/ml 时，抗cl（或 rac）单抗-胶体金复合物与cl（或rac）结合，t线显色比c线浅或完全看不到线，且cl（或rac）浓度越高t线显色越浅，从而作出判定。滴金免疫技术具有简便易行、快速、试剂安全、特异性高、可单份测定、不需要特殊仪器和设备等优点，且金标试剂比酶试剂更稳定，冷冻干燥后可长期保存，便于常规应用。4.5 时间分辨荧光免疫分析技术
时间分辨荧光免疫分析技术（trfia）是一种新型的超微量的非放射性标记免疫分析技术，它以镧系元素为标记物。时间分辨荧光免疫分析技术集酶标记免疫分析和放射免疫分析等优点于一身，且克服了酶标记物的不稳定性、化学发光仅能一次发光且易受环境干扰和电化学发光的非直接标记等缺点，降低了非特异性信号，达到了极高的信噪比，大大地超过了放射性同位素所能达到的灵敏度，且还具有标记物制备方便、储存时间长、无放射性污染检测重复性好、操作流程短、标准曲线范围宽、不受样品自然荧光干扰、应用范围广泛等优点。因此，越来越受到人们的关注。目前，国内外应用于盐酸克伦特罗检测的时间分辨荧光免疫分析技术的报道还较少，随着技术的越来越成熟，其应用将更广泛。如果研制成检测盐酸克伦特罗的时间分辨荧光免疫分析技术试纸条，将可对盐酸克伦特罗的残留进行现场检测 [16]。
4.6 生物传感技术
将生物技术与微电子技术相结合，利用生物体内抗原、抗体专一性结合而导致电化学变化设计成免疫生物传感器。将cl（或rac）抗体微型化膜固定于换能器（工作电极）表面，测定时在待测样品溶液中加入已知浓度的酶标激素，cl（或 rac）与标记抗原竞争性地结合电极上的抗体，使经洗涤后的电极与底物溶液接触，标记酶催化底物发生相应的化学变化，转变为电信号输出，输出显示和数据处理系统将信息进行数据处理和输出，直接显示测得cl（或 rac）的含量。
国外已有用生物传感器技术检测clb残留的资料报道, 如 pizzariello andrea 应用分子印迹聚合膜（mip）作为分子识别系统，选择固相基质复合电极（sbmce）作为换能器，微分脉冲电压电流表（dpv）作为输出显示装置检测牛肝脏中clb残留，结果此方法特异性强，与其他同类物质交叉反应低，缺点是反应时间较长，灵敏度还有待于提高[17]。目前酶免疫传感器的灵敏度达 0.01μg/kg，而且可在几分钟之内完成检测全过程。目前研制成功的检测盐酸克伦特罗的酶免疫传感器，检测限为0.3μg/kg，可 在10 min内完成检测全过程，且传感器体积小（15 cm×7 cm×2 cm），便于携带和实现现场检测 [18]。生物传感器具有选择性好、响应速度快、样品用量少、操作简易、价格低廉、定量准确，且其结构简单、体积小、携带和使用方便、可以实现连续的在线检测和反复使用等优点。4.7 毛细管电泳法
gausephol 和 blaschke（1998）应用毛细管区带电泳法检测人尿中盐酸克伦特罗的残留，最低检测限达到0.5 μg/l，而且精确度和准确度均符合生物样品中残留物的检测标准[19]。毛细管区带电泳法分离效率可达几百万理论塔板数，操作简便，快速，所需样品量极少，而且灵活性大，许多分离参数可以调节，但是所需仪器非常昂贵和复杂。
参考文献
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瘦肉精快速检测卡工厂 瘦肉精快速检测卡购买篇四
xxx瘦肉精(盐酸克伦特罗)专项整治工作方案
县食品药监局、公安局、农业局、卫生局、工商局、质监局、屠
宰办
为确保我县肉品质量安全，保障人民群众身体健康和生命安全，维护社会和谐稳定，决定在全县继续深入开展瘦肉精专项整治工作，现提出如下工作方案：
一、指导思想
以邓小平理论和“三个代表”重要思想为指导，认真贯彻落实科学发展观，围绕全面建设“平安获嘉”、构建社会主义和谐社会的要求，按照“标本兼治、着力治本”的工作方针，坚持集中整治与制度建设、加强监管与规范引导、打击违法与扶优扶强相结合，大力整治违法生产、经营和使用瘦肉精等突出问题，全面提高肉品质量安全保证水平，确保人民群众饮食安全。
二、整治目标
通过整治，使非法生产、销售和使用瘦肉精等违法行为得到有效遏制，饲料生产和经营、生猪养殖和屠宰、猪肉加工和流通以及餐饮等环节的秩序得到进一步规范，力争在全县范围内基本杜绝生猪养殖违法使用瘦肉精等禁用药物的现象，确保人民群众吃上“放心肉”。
三、整治时间
2011年x月x日至2011年x月底。
四、整治内容
以猪饲料及饲料添加剂生产加工和经营单位、生猪养殖场（户）和生猪定点屠宰企业为主要对象，开展全面排查和专项检查，严厉打击非法生产加工、销售、使用瘦肉精等禁用药物的行为。
五、整治重点
（一）查处饲料生产经营企业生产、销售含瘦肉精等禁用药
物的饲料及添加剂的行为，坚决取缔非法生产、销售瘦肉精等禁用药物的窝点和网络。
（二）查处生猪养殖场（户）使用瘦肉精或含瘦肉精等禁用药物的饲料及添加剂喂养生猪的行为，在规模养殖场（户）中推行生猪质量安全告知承诺制度。
（三）落实生猪宰前尿液检测制度，督促屠宰企业建立健全屠宰加工进出台账、档案。
（四）在农贸市场、超市等流通环节和餐厅、食堂等餐饮环节落实猪肉进货台账和索证索票制度。
六、职责分工
农业部门负责饲料及饲料添加剂生产加工、经营和生猪养殖环节的整治。在饲料生产经营环节，要严厉打击在猪饲料中添加瘦肉精、无机砷等有害物质的违法行为，会同工商部门取缔无质检设备、无技术人员、不能保证产品质量的饲料加工单位（点）。在生猪养殖环节，要严厉打击饲养户和养殖场使用瘦肉精等违法行为；对宰前检测呈阳性的生猪进行源头查处，并及时向有关部门通报处理结果；建立养殖场（户）使用禁用药物的“黑名单”制度，落实养殖场（户）告知承诺制度。对出县的生猪，必须进行瘦肉精抽检；加强对外地货源生猪检疫的监督管理，对问题较多的产地，及时督促购销企业调整货源。
县生猪定点屠宰管理部门负责生猪屠宰环节的整治。加强对生猪屠宰企业的监管，督促各场、点做好宰前瘦肉精检测工作；会同农业部门对定点屠宰场(点)瘦肉精的宰前检测和检测呈阳性生猪无害化处理制度的落实情况开展监督检查；会同农业、工商等部门取缔私屠滥宰行为。
质量技监部门负责非法生产加工瘦肉精行为的排查和肉制品加工企业的整治。对排查发现非法生产加工瘦肉精的，要及时移送有关部门从严查处。同时，加强对以鲜猪肉为原料生产加工肉制食品企业的监管，加大对猪肉制品监督抽查和质量问题的查
处力度，督促企业加强原料进货检验和产品出厂检验。
工商部门负责对农贸市场、超市等流通环节肉类经营者的监管。重点检查经营者进货台账和索证索票制度的落实情况，切实防止问题猪肉的流通。同时，要加强对非法销售瘦肉精等禁用药物行为的监管，严厉打击不法行为。
卫生部门负责餐饮消费环节的整治。依法对餐厅、食堂等餐饮单位使用的猪肉开展瘦肉精等禁用药物的抽检，督促餐饮单位建立肉品采购索证索票、进货登记和品质验收制度，专人负责验收，确保购进猪肉均有生猪检疫、检验合格证明，做到加工制作食品不使用来路不明和无检疫、检验合格证或检疫、检验不合格的猪肉，以及病死猪肉或私自屠宰的猪肉。同时，引导自办筵席的农村家庭通过正规渠道采购猪肉。
公安部门负责涉嫌生产、销售和使用瘦肉精等禁用药物犯罪案件的侦查。要依法严肃查处各类涉嫌瘦肉精等禁用药物犯罪的案件，对事实清楚、证据充分的，及时移交检察机关审查起诉。同时，对一些重大案件，要及时主动介入调查。
食品药品监管部门负责食品安全的综合监督、组织协调，并依法组织查处重大事故。同时，要加强对药品生产经营企业生产、销售盐酸克仑特罗的监管。县食品安全委员会办公室要认真做好瘦肉精专项整治的牵头协调工作，加强与有关部门的联系沟通，及时掌握专项整治的动态情况，组织有关部门查处整治中出现的新情况、新问题。
七、工作要求
（一）统一思想认识。确保肉品质量安全，是食品安全工作的一项重要内容，事关人民群众身体健康和生命安全，事关社会和谐稳定大局。各有关部门务必要把思想统一到建设“平安获嘉”、构建社会主义和谐社会的决策部署上来，把这次整治活动作为当前的一项重要任务，高度重视，周密部署，迅速行动，扎扎实实地抓好各项工作。
（二）加强组织领导。本次瘦肉精专项整治工作，由县食品安全委员会办公室牵头，农业、卫生、工商、质量技监、屠宰办、公安、食品药品监管等部门共同组织实施。各有关部门要各司其职，各负其责，密切配合，共同做好专项整治的各项工作。
（三）认真开展普查。各有关部门要组织力量对饲料生产加工、生猪养殖场、生猪屠宰单位等进行全面检查，做到不留死角，不留盲县。重点检查生猪养殖、屠宰、流通、消费和肉制品生产加工等各个环节相关单位的养殖档案、屠宰台账、肉品进货台账和承诺制度、瘦肉精宰前检测制度、索证索票制度的落实情况，以及饲料生产加工记录、瘦肉精宰前检测记录，并在此基础上建立健全监管档案。对检查中发现的不规范生产经营行为要督促及时纠正，对触犯法律的，要发现一起，查处一起，决不姑息。
（四）搞好宣传动员。各有关部门要加强宣传教育，动员社会各界关心、支持、参与瘦肉精专项整治行动。有关部门要向社会公布举报电话，发动群众举报非法生产、销售、使用瘦肉精和饲料及饲料添加剂，以及非法屠宰、销售不合格猪肉和使用不合格猪肉生产加工食品等违法行为。
（五）加强监督检查。县食品安全委员会办公室要会同农业、卫生、工商、质量技监、屠宰办、公安、监察、食品药品监管等有关部门组成督查组，对整治工作进行督查；同时，组织人员对重点地县、重点环节进行暗访。对宰前瘦肉精检测等工作和责任不落实的单位，要进行通报批评；对因工作不力，发生严重瘦肉精中毒事件的，要依法依纪追究有关负责人和责任人的责任。整治工作结束后，各有关部门要对专项整治工作进行总结，并将总结报告于20xx年x月x日前报县食品安全委员会办公室，县食品安全委员会办公室汇总后报市食品安全委员会办公室。
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食品与发酵工业 food and fermentation industries
动物性食品中盐酸克伦特罗(瘦肉精残留危害 及其检测方法研究进展 张清安 范学辉(陕西师范大学食品工程系,西安,710062 摘 要 介绍了盐酸克伦特罗(瘦肉精的理化特性,分析了它在动物性食品中残留对人体和国民 经济所造成的危害,同时又综述了动物肌肉组织中残留盐酸克伦特罗(瘦肉精的各种分析检测方 法并作了展望。关键词 动物性食品,盐酸克伦特罗,残留,检测方法 第一作者:硕士,讲师。收稿时间:2004-06-22 1 盐酸克伦特罗的理化特性及药用机 理 1.1 盐酸克伦特罗的理化特性 盐酸克伦特罗(clenbuteerol ,clb ,又名克 喘素、氨哮素、双氯醇胺,俗名瘦肉精,化学名为 α2[(叔丁氨基甲基]242氨基23 , 52二氯苯甲醇 盐酸盐,分子式为c12 h18 cl12 n2o·hcl ,相对分 子质量为313165。它是一种选择性β2肾上腺 素受体激动剂,白色或类似白色的结晶体粉末, 无臭、味微苦,易溶于水、甲醇、乙醇,微溶于氯 仿,不溶于苯和乙醚,化学性质稳定,加热到 172℃才开始分解,经260℃油煎5 min才会破 坏减半[1 ,2 ]。口服后在胃肠道中迅速吸收,10～20 min起效,2～3 h血液浓度达到峰值,作用 维持5 h左右,半衰期为25～39 h ,消除5个半 衰期(消除97 % ,约需5～8 d ,在动物眼睛、毛 发、肝、肺、肾等组织中易引起蓄积[3 ]。112 盐酸克伦特罗的药用机理 盐酸克伦特罗(clb于1964年首次在美 国合成,属于β类兴奋剂,最初在临床上主要用 于防治人、畜支气管哮喘和痉挛。研究证明作 为药物clb对呼吸、生殖、泌尿、骨骼、神经等 系统疾病具有较好治疗作用。其机理在传出神 经系统,β受体主要分布于血管、支气管、骨骼 肌和平滑肌等部位,盐酸克伦特罗与β受体选 择性结合后,使β2受体出现兴奋效应,主要表 现为平滑肌舒张、通气改善等[ 4 ]。1984年美国(> 1μg/ kg· 明显促进动物生长、改善胴体品质、提高瘦肉 率,于是欧美等国开始将clb广泛用于动物饲 一家公司意外发现高于治疗剂量5～10倍以上 d clb添加于饲料饲喂动物后,可 料[5]。20世纪 80年代后期 ,我国部分大专院 校和科研机构也开始向饲料企业和养殖户推广 该物质作为饲料添加剂使用。由于 clb能使 饲料转化率和瘦肉率提高 10 %～15 %,骨骼肌 脂肪降低 8%～15 %,所以养殖户和饲料企业 经常把 clb叫作“瘦肉精”或“肉多素”。其提 高瘦肉率机理在于 clb通过肾上腺素刺激腺 苷酸环化酶的合成 ,从而升高环磷酸腺苷(camp的浓度 ,提高激素敏感脂酶的活性 ,加 快脂肪分解 ,使血液中游离脂肪
酸(ffa进入 肌肉量增加 ,进一步为蛋白质的合成提供物质 基础;同时 ,clb作为一种植物性神经调节剂 , 可降低血液中抑制肌肉兴奋性的 mg2 +浓度 , 间接促进肌肉兴奋 ,改变细胞膜的通透性 ,参与 机体内的代谢调控及营养重新分配 —— ——抑制蛋 白质的分解和脂肪的合成 ,进而增加氮的组织 沉积[6]。2 动物性食品中盐酸克伦特罗的残留 危害 211 动物性食品中盐酸克伦特罗的残留 108
2004 vol.30 no.9(total 201 分析与检测 由于盐酸克伦特罗在动物生产中有明显的 促生长和提高瘦肉率的作用 ,受此利益驱使国 内外 clb在养殖业中滥用问题非常严重。又 因 clb在生产中的用量是治疗量的 5～10倍 , 而且持续添加时间(3周以上 和在体内消除半 衰期(25～39h都很长 ,所以极易在动物组织中 蓄积残留 [6]。在机体的各个组织中 ,clb在眼 和毛发中残留的浓度最高 ,如眼中 clb残留量 比血浆中浓度高 107倍。原因是 clb对不同 组织有选择性 ,首先选择有色素沉着的眼组织 和毛发组织沉积 ,且在眼组织中主要结合在有 色素沉着的视网膜和脉络膜上 ,而在无色素的 眼的其他部位则蓄积较少。除了眼和毛发 ,其 他器官的残留情况是:肺、肝、肾约为血浆浓度 的20～90倍,肌肉和脂肪为3～15倍。如果在 屠宰前没有休药期,则残留量将更高[6 ,7 ]。早在1987,欧盟、美国已宣布禁止使用 今世界范围内已有数以千计甚至万计因食用残 留有瘦肉精的动物源食品而中毒的人员。人食 用残留有盐酸克伦特罗的畜产品后表现为肌肉 兴奋性增强,有的人中毒后表现为肌肉震颤,重 症者腓肠肌痉挛;同时引起心肌收缩加强,心率 加快[8 ];对高血压患者危害更大, clb分解脂 肪成游离脂肪酸进入血液,使血管壁弹性降低, 引起血压升高,微循环血管膨胀,压迫刺激周围 的神经,引起头痛头晕;引起人内脏横纹肌和平滑肌兴奋性增强,表现为呕吐和腹泻;又因体内 k+、ca2 +、na +和mg2 +等浓度的平衡破坏,导 致细胞膜生物电位去极化能力增强,复极化能 力减弱,细胞膜对离子通透性改变,心电图可呈 “t波倒置或底平”, st段下移等,若患者发生 死亡,则死于心脏舒张期或心肌梗死。clb中 毒的患者群中,对患心、脑血管疾病、糖尿病、甲 状腺亢进、青光眼、前列腺肥大者可造成威胁生 clb作为兽用饲料添加剂我国政府也于,1997 年在“浓牧发 [1997 ]3号《关于严禁非法使用兽 药的通知》 ”中已明确禁止其在饲料中添加使 用。但也有许多国家并没有确定动物性产品中 clb的最大残留限量(mrl。美国
食品药物 管理局(fda和世界卫生组织(who建议盐 酸克伦特罗在动物组织中最高残留限量为 :肉 012μg/ kg、肝 016μg/ kg、肾 016μg/ kg、脂肪 012μg/ kg、乳 0105μg/ kg;部分欧盟成员国如英 国规定可食性组织中 mrl值为 015μg/ kg ,荷 兰规定牛、马肝脏组织中 mrl值 015μg/ kg[8]。212 动物性食品中盐酸克伦特罗的残留危害 虽然盐酸克伦特罗的毒性并不是很强 ,小 鼠、豚鼠静脉注射的半数致死量分别是每公斤 体重 2716 mg和 1216 mg[2]。但是由于它的半 衰期长 ,在体内代谢慢 ,极易蓄积残留于动物体 内 ,在动物肝脏中 clb平均浓度可达 45 mg/ kg ,也就是说 ,按临床最高治疗剂量每天 018 μg/ kg计算 ,人食用 100 g被 clb污染的动物 肝脏摄入体内的 clb就相当于一次治疗剂量 的 10倍以上 ,因而极有可能通过食物链使人体 中毒而对健康构成威胁 [9]。自上世纪 80年代 中期欧美国家发现瘦肉精的毒副作用以来 ,至 命的恶果。孕妇中毒又可导致癌变、胎儿致畸 的严重危害性 [ 10 ,11 ]。欧盟成员国已将 clb残 留作为肉品进口必检项目 ,因而这也成了 wto成员国之间进行国际贸易的技术壁垒。由此可见 ,clb的非法使用及残留不但严重地 威胁着消费者的健康 ,而且也影响着一个国家 的对外贸易和声誉。我们应借鉴美国、欧盟等 国家在动物产品生产和食品工业上实施的良好 生产规范(gmp、危害分析与关键控制点(haccp和全过程质量控制(ikb等管理经 验 ,并结合我国动物产品生产的特点 ,引入全过 程质量控制的新理念 ,加强养殖、屠宰加工和销 售环节的质量管理 ,减小甚至消除 clb残留造 成的危害 [12 ]。3 动物性食品中盐酸克伦特罗的检测 方法
当前 ,造成盐酸克伦特罗屡禁不止的原因 之一就是国内外检测 clb的方法、手段还不完 善 ,还没有建立宰前监测体系和准确、迅速、方 便、精确的检测方法 ,从而使不法分子有机可 乘。目前国内外用于检测动物性食品中盐酸克 伦特罗的方法主要有以下几种。109 2004年第 30卷第 9期(总第 201期
分析与检测 国已将 hplc法作为检测饲料中 clb残留的 半确证法 ,将 gc2ms法定为确证性方法 ,主要 用于最后确认和仲裁 ,而对于动物性食品中 clb残留尚未有检测标准。hplc法中常用的 检测器有电化学检测器、紫外检测器;hplc法 优点是检测精确度高 ,其最低检测限范围为 1～15 ng/ g ,而且假阳性率低 ,与 gc2ms法相 比样品不必衍生;缺点是检测过程烦琐、检测时 间长 ,需贵重仪器、难
于操作、价格昂贵 [18 ]。gc2ms法优点是能在多种残留物同时存在情 况下对某种特定的残留物进行定性、定量分析。与 hplc相比 , gc2ms法灵敏度更高 ,假阳性 率更低 ,其缺点也同 hplc法一样。ce法非 常适用于难以用传统的液相色谱法分离的离子 化样品的分离与分析。优点是有很大的灵活 性 ,许多分离参数 ,如缓冲液的组成和 ph值 , 毛细管的类型以及所使用的电场的波形都可以 调节 ,操作简便 ,所需样品量极少 ,一般只需几 纳升。缺点是检测时间仍很长 ,不能满足在线 检测 ,仪器复杂、缺乏配套的检测器 [19 ]。((tlc [4 ,12 ,15～17 ] gc2ms、毛细管区带电泳法。其中前3种方法最常用,中、薄层色谱法f tir 2gc((ce、高效液相 傅立 的 r2biopharm公司分别开发出了检测肉品、饲 色谱 2质谱联用法
(hplc2ms、气相色谱 2料中 clb残留的 el isa试剂盒 ,但其价格费 叶红外联用法 用极高 ,每检测一份猪肉是否含 clb的费用是 1 200～1 400元。正因如此 ,国内许多科研院 311 感官识别 [ 13 ,14 ] 凡饲喂盐酸克伦特罗比较严重的猪宰后肉 色特别鲜红、后臀肌肉饱满突出 ,脂肪非常薄 , 肉皮紧贴着瘦肉、瘦肉纤维比较疏松 ,肉皮与瘦 肉之间无肥肉(肥膘厚度不到 115 cm ,有时有 少量“汗水”渗出肉面 ,这种肉就很可能含有 clb;而一般健康肉淡红色 ,肉质弹性好 ,也不 会有 “出汗”现象。通过这种感官识别方法就可 以快速、简单、定性对动物性食品中有无 clb 作出初步判定。312 色谱检测技术 目前 ,检测 clb残留常用的色谱技术有高 效液相色谱(hplc、气相色谱 2质谱联用法 313 免疫分析技术(ia 标记免疫分析技术是 “迈向 21世纪的医学 检验技术”之一 ,其发展趋势是 :新标记物的发 110
2004 vol.30 no.9(total 201 展与联合应用、单克隆以及基因工程抗体的应 用和免疫放大技术 ,可明显提高检测特异性 ,灵-敏度可达 zepto(10-20、yocto(10 24 水平,即 可实现分子水平的检测 [20 ]。目前 ,用于检测 clb残留的免疫分析技术主要有放射免疫分 析技术(ria和酶免疫分析技术(eia。国外 已生产出运用 ria测定 clb残留的试剂盒 , 还建立了类似放射免疫分析法的放射受体分析 法 ,这种方法是用受体代替抗体结合 clb ,检 测限可达 214 ng/ g ,国内在此方面的研究尚属 空白 [21～23 ]。对于 eia分析技术中检测 clb 残留较高效的是酶联免疫吸附技术(el isa。目前 ,英国的 randox laboratories ltd和德国 所都在开发研制检测 clb残留的 e
l isa试剂 盒。据报道 ,中国疾病预防控制中心营养与食 品安全研究所和上海市畜牧兽医站与上海赛群 生物科技有限公司联合开发研制的瘦肉精 el isa检测试剂盒也已分别问世 ,且后 2家单 位联合开发产品已投入商品化生产及实际应用 中。经与同类进口试剂进行对比试验 ,结果显 示国产试剂盒在灵敏度、准确性上都已达到进 口试剂盒的水平,而在稳定性、回收率方面要优 于进口试剂盒 ,且价格费用要下降很多 [24 ]。el isa的优点是灵敏度高、操作简便、检测迅 速;缺点是仍不能实现在线检测 ,而且假阳性率 较高。314 综合化学法 根据 clb的化学结构与性质 ,参照国家药 典标准方法可以进行综合鉴别 [25 ]。因其溶于 水和乙醇 ,故可以用水进行提取。clb可显示 芳香一胺类的鉴别反应 ,也可以显示氯化物的 鉴别反应 ,同时 ,用分光光度计检测 ,可在 243 nm与 296 nm的波长处得到最大吸收。综合分 析可以判定动物性食品中是否存在 clb类物 质 ,且该法不需昂贵的仪器与试剂 ,也没有复杂 的样品前处理 ,操作简单 ,无疑是基层卫生防疫 分析与检测 clb的高效在线检测 [15 ] 原理为当分子识别部分与被识别物质相接触 光变化以及直接 诱导电信号 ,而后利用电学测量方法进行检测、控制和显示输出。国外已有用生物传感器技术 检测 clb残留的资料报道 [26] ,其优点是特异 性强、假阳性率低、高效、方便 ,国内未见有开发 成功的相关报道。总之 ,尽快研制出高效、方 便、迅速的 digfa试纸条和生物传感器是检 测 clb残留较为理想的方法和途径 ,也是今后 发展趋势。及准确度均很理想。如果研制出检测。对于生物传感器,其 时,可发生化学变化、热变化、clb的13 闫红军,马巧娥.提高卫生知识水平严防 中毒[j ].动物医学进展,2003 ,24(5 :127 “瘦肉精” 滴金免疫试纸条或滴金免疫测试盒则可实现 14 李 杰.瘦肉精残留危害与动物性食品安全 [j ].中国饲料 ,2003 ,4 :31～32 工作者初选 clb残留的有效方法 ,但最低检测 限较高 ,灵敏度低。4 盐酸克伦特罗检测技术的未来趋势 和发展方向
根据目前国内外检测 clb各种方法的进 展情况以及 clb滥用及残留的严峻性 ,建立一 种克服上述各种检测方法缺点的简便、快速、精 确、可实现在线检测的 clb技术势在必行。滴 金免疫技术(digfa 和生物传感器技术(biosensor ,bs是 2种快速、高效的残留物分析 技术。其中 digfa技术已成功的运用于早孕 诊断、弓形虫病诊断、血吸虫病诊断等 ,灵敏
度 参考文献 1 张琪玉 ,李海云 1盐酸克伦特罗中毒 40例分析 [j ]1中国医师杂志 ,2002 ,4(9 :1 035～1 036 2 蒋巧燕 1盐酸克伦特罗中毒 11例分析 [j ]1医学理 论与实践 ,2002 ,15(4 :434 3 陈永壮 “瘦肉精”中毒的流行病学特征及防治对策 1 [j ]1中国卫生监督杂志 ,2002 ,9(5 :280～281 4 刘国艳 ,柴春彦 1如何全面认识 “瘦肉精” [j ]1动物 科学与动物医学 ,2002 ,19(6 :1～3 5 elliott c t , mccaughey w j , crooks s r h et al1residues of clenbuterol in cattle receiving therapeu2 tic doses:implicationsfor differentiating between legal and illegal use[j ]1 vet q ,1995 ,17 :100～102 6 凌明亮 ,黄仁术 1瘦肉精的危害及检测方法 [j ]1安 徽农学通报 ,2003 ,9(4 :87～88 7 sauern m j ,pickett r j h ,limer s et al1distribution and elimination of clenbuterol in tissues and fluids of calves following prolonged oral administration at a grow-promoting dose[j ]1j vet pharmacol therap , 1995 ,18 :81～86 8 林荣泉 1瘦肉精对人的危害及防治 [j ]1肉类工业 , 2002 ,7 :30～31 9 张 玲 ,邵春花 1瘦肉精的危害及其预防措施 [j ]1新疆农垦科技 ,2003 ,6 :19～20 10 汪令四 1含“瘦肉精”畜产品对人体健康的危害 [j ]1畜牧兽医杂志 ,2002 ,21(4 :29～30 11 张 呤 ,陈一农 1克伦特罗药理作用的研究进展 [j ]1海峡药学 ,2002 ,14(5 :10～11 12 宋兴国 ,陈 杰.瘦肉精的快速检测方法 [j ].山东 畜牧兽医 ,2003 ,3 :28～29 15 黄传峰 ,李晓华 ,吴宜群.克伦特罗检测方法进展 [j ].中国卫生检验杂志 ,2002 ,12(5 :634～636 16 黄宏南 ,谢剑峰.盐酸克伦特罗(瘦肉精 的检测方 法进展 [j ].福建畜牧兽医 ,2003 ,10 :27～28 17 蔡玉枝 ,罗晓燕 ,苏文周.高效液相色谱法测定猪 组织中盐酸克伦特罗残留量 [j ].中国卫生检验杂 志 ,2002 ,12(2 :193～194 18
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分离与提纯 表 3 不同抗氧剂对猪油的抗氧化 作用(pov值 mmol/ kg 样 品 时间 /d 0 48 013 %提取液 01062 01068 01287 013 %抗坏血酸 01062 01089 01301 013 %柠檬酸 01062 01132 01413 013 %edta 01062 01066 01279 3 结 论 比较了几种不同提取方法的提取效果 ,实 验显示 :体积分数 75 %乙醇提取法提取率较 高 ,提取物比较容易浓缩和干燥 ,是一种较好的 提取方法。柿叶黄酮类化合物的抗氧化性较强 ,通过 对猪油的抗氧化效果试验发现 :其抗氧化效果 比抗坏血酸和柠檬酸稍强。参考文献 1 谭仁祥 1植物成分分析 [m]1北京 :科学出版社 , 2002.486～502 2 万素英 ,赵亚军 ,李 琳等 1食品抗氧化剂 [m]1北 京 :中国轻工业出版社 ,1998 study on extraction method and antisong changchun bao qingsheng(department of basic courses , anhui technical teachers college , bengbu , 233100 2oxidation property of flavonoid compound from leaves of diospyros kaki abstract the extraction method of flavonoid in leaves of diospyros kaki was studied1 the opti2 mum extracting process was put forward , and anti2oxidation property of the extract from the leaves of diospyros kaki was studied1 the results showed that the optimum extracting technical process was 75 % alcohol1 effect of flavonoid from the leaves of diospyros kaki was higher than ascorbic acid and citric acid1 key words leaves of diospyros kaki , flavonoid ,extraction method ,antioxidant(上接第 111页 和国药典 [m].北京 :化学工业出版社 ,1995.62923 彭笑蓉 ,孙文梅.竞争酶标免疫法检测“瘦肉精” ～630 [j ].河北畜牧兽医 ,2003 ,19(4 :42～43 26 pizaariello a , stred’ansky m , stred’ansky s et al.24 张苏华 ,黄士新.国产“瘦肉精” el isa试剂盒与a solid binging matrix/ molecularly imprinted poly2 同类进口试剂盒的对比试验 [j ].上海畜牧兽医通mer-based sensor system for the determination of 讯 ,2003 ,4 :20～21 clenbuterol in bovine liver using differential-pulse 25 中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共
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